ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。
但ELISA测定中影响因素较多,而且其操作中有一定的技术要求,在检测过程中除正常反应外,有时常见到一些错误的结果。
引起ELISA测定错误结果的原因主要有:①*因素;②*因素;③操作因素。
下面就一些常见ELISA操作过程中的问题一一分析。
大鼠胶质细胞系来源的神经营养因子(GDNF)酶联免疫吸附测定*盒
1.样品稀释酶联免疫反应是一种敏感性很高的反应,如果血清不稀释,不可避免会产生很强的非特异性反应,出现假阳性。因此,国外检测血清抗体的*盒,均规定将血清稀释至适当的倍数,以降低非特异性反应,使特异性的抗原抗体反应充分体现出来。一般产品的样品稀释倍数均通过大量试验确定,以保证试验的灵敏度和特异性。但是,有些用户未能严格按使用说明书操作,如某些产品应取10μl样品进行稀释,个别用户取5μl甚至1μl样品进行稀释,由于吸嘴上不可避免地沾有样品以及微量移液器的精度不够,因此造成样品稀释倍数不准确,检测结果出现问题。
2.*盒平衡*盒中所有*和板条均应在试验前平衡至室温(约25℃),一般需在室温放置20~30分钟以上。平衡时间太短会造成*混匀不够,样品孵育时间相对缩短,ELISA反应不够充分。冬季室温低,可将*盒置37℃温箱20分钟。
3.样品和*的混匀稀释前、后的样品必须充分混匀,所有*在加样前也须摇匀,以保证试验的均一性。大鼠胶质细胞系来源的神经营养因子(GDNF)酶联免疫吸附测定*盒
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